藍光切膠儀通過LED藍光(波長通常為470nm左右)激發凝膠中染色的核酸或蛋白質條帶,使其發出熒光以便觀察。與傳統的紫外透射儀相比,藍光具有更高的安全性(不損傷DNA/RNA),同時兼容多種染色劑(如EB替代染料、SYBR Green等)。部分儀器采用側面或底部光源設計,通過濾光片過濾雜光,提供均勻的藍色背景照明,使條帶清晰可見。
藍光切膠儀的操作要點:
1.染色選擇:優先選用低毒或無毒熒光染料(如GelRed、SYBR Safe),避免使用高濃度EB,以減少污染風險。
2.光源調節:根據凝膠厚度和熒光強度調整光強,過亮可能導致條帶過曝,過暗則影響觀察。
3.切割技巧:使用專用清潔刀具(如滅菌刀片或手術刀),在藍光下快速切入凝膠,盡量減少拖拽以免破壞條帶完整性。
4.防護措施:雖然藍光無害,但長時間直視可能引起視覺疲勞,建議佩戴護目鏡并縮短單次觀察時間。
5.設備維護:定期清潔透光面板,避免染料殘留影響觀察效果;長期停用時需切斷電源。
藍光切膠儀的測定步驟:
1.準備膠樣:將待分離的蛋白質樣品通過電泳在瓊脂糖凝膠上進行分離,分離完畢后,將膠樣放置在透明塑料薄膜上,并將其切割成需要的大小。
2.操作設置:打開,并按照儀器說明書設置相應的波長和電壓。
3.進樣:將切割好的膠樣放入切膠儀中,確保膠樣與光源保持適當距離,以便觀察熒光。
4.觀察與記錄:在藍光照射下,觀察膠樣中的熒光條帶,使用相機或手機拍攝記錄所需條帶的位置和大小。
5.切膠:根據記錄的信息,使用專用切膠工具從凝膠中切取目標條帶,注意避免污染和損傷其他部分。
6.后續處理:將切取的膠條進行進一步的純化、分析或其他實驗操作。